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什么是核酸纯化?

2023-06-26

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核酸纯化的目的是以最佳方式将DNA和/或RNA从所有其他细胞和细胞外成分中分离出来并进行纯化。纯化可以去除所有(细胞外)成分和其他干扰物质。一般来说,基质成分会产生负面影响(吸附、抑制和水解),而生化试剂会刺激或抑制测定,如PCR,取决于其浓度。创造一个可以提纯DNA和/或RNA的水环境是非常重要的。一旦细胞的完整性被打破,许多可能干扰PCR结果的因素就会释放到溶液中。尽管粗制的分离物可以作为PCR的样本,但大多采用纯化步骤。这尤其涉及到容易迅速分解的mRNA。

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现在常规分子诊断中使用的大多数程序都是基于核酸和硅酸盐的亲和力结合,同时洗掉所有其他成分。通过这种方式,可以得到几乎只含有核酸的纯化洗脱液。以前,核酸研究的金标准是苯酚-氯仿-异戊醇萃取。这种方法在很大程度上已经被新的方法所取代,这些方法花费的时间更少,产生的有毒废品更少,而且应该对许多常规应用足够有效。